1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測。

2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點：①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。

【資料圖】

3、②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。

4、③高效：分離效能高。

5、可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

6、④高靈敏度：紫外檢測器可達0.01ng，進樣量在μL數量級。

7、⑤應用范圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢。

8、擴展資料高效液相色譜還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。

9、高效液相色譜的缺點是有“柱外效應”。

10、在從進樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬，柱效率降低。

11、高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

12、空間排阻色譜法以凝膠(gel) 為固定相。

13、它類似于分子篩的作用，但凝膠的孔徑比分子篩要大得多，一般為數納米到數百納米。

14、溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離，而是按分子大小進行分離。

15、分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。

16、試樣進入色譜柱后，隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。

17、在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻，因此就直接通過柱子，首先在色譜圖上出現，一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中，這些組分在柱上的保留值最大，在色譜圖上最后出現。

18、參考資料來源：百度百科-高效液相色譜法。

本文分享完畢，希望對大家有所幫助。

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